4原理
检样在MPC琼脂内,于6.5℃条件下培养10 d,菌落计数,算出每毫升检样中的嗜冷菌数。5稀释液和培养基
5.1蛋白陈-盐溶液5.1.1成分
酶水解酪蛋白脓
1.0 g
氯化钠
8.5 g
蒸馏水
1 000 mL
5.1.2制法
将酶水解酪蛋白陈和氯化钠溶解于蒸馏水中,用质量分数15%氢氧化钠溶液校正pH至7.0±0.1。分装试管和烧瓶,每管9mL,每瓶90 mL或225 mL,相对误差不超过±2%。密封后,121℃±1℃高压灭菌15 min。
5.2 磷酸盐缓冲液:按GB/T 4789.28—2003中3.22规定进行制备。5.3 MPC琼脂培养基
5.3.1成分
胰蛋白脉
5.0 g
酵母浸膏
2.5 g
葡萄糖
1.0 g
脱脂奶粉
1.0 g
琼脂
10 g~15 g
蒸馏水
1 000 mI.
注1:脱脂奶粉不应含有抗生素类物质。
注2:琼脂用量根据其凝固程度决定。5.3.2制法
将5.3.1中除琼脂以外的各成分溶解于蒸馏水中,用质量分数15%氢氧化钠溶液校正pH至7.0±0.1。加人琼脂,加热煮沸,使琼脂溶化。必要时使用两层纱布之间夹脱脂棉过滤,分装烧瓶。密封后，121℃±1℃高压灭菌15min。若立即使用此培养基,在水浴(6.3)中将其冷却到45℃;否则,将灭菌后的培养基放于暗处温度为0℃~5t之间贮存,时间不超过30d。为了避免延误倾注培养基的时间,微生物检测之前,加热融化培养基。然后,于水浴(6.3)中冷却到45℃。
