1范围
本标准规定了鲜乳中抗生素残留的检验方法。本标准的**法适用于鲜乳中能抑制嗜热链球菌(Stre ptococcus thermo philus)的抗生素的检验;第二法适用于鲜乳中能抑制嗜热脂肪芽胞杆菌卡利德变种(Bacillus stearothermo philus var. calidola-ctis)的抗生素的检验,也可用于复原乳,消毒灭菌乳、乳粉中抗生素的检测。
2原理
样品经过80℃杀菌后,添加嗜热链球菌菌液。培养一段时间后,嗜热链球菌开始增殖。这时候加人代谢底物⒉3.5-氯化三苯四氮唑(TTC),若该样品中不含有抗生素或抗生素的浓度低于检测限,嗜热链球菌将继续增殖,还原TTC成为红色物质。相反,如果样品中含有高于检测限的抑菌剂,则嗜热链球菌受到抑制,因此指示剂TTC不还原,保持原色。
3设备和材料
除微生物实验室常规灭菌及培养设备外,其他设备和材料如下:3.1冰箱:2℃~5℃、-20 C~-5 ℃。
3.2恒温培养箱:36C士1 ℃.
3.3带盖恒温水浴锅:36℃土1 ℃8o ℃士2℃.3.4天平;感量0.1 g,0.001 g.
3.5无菌吸管:1 mL(其 0.01 mL刻度).10.0 mL(具0.1 mL刻度)或微量移液器及吸头。3.6无菌试管;18 mm×180 mm.
3.7温度计:o C~100 ℃.3.8旋涡混匀器。
4菌种.培养基和试剂4.1菌种:嗜热链球菌。
4.2灭菌脱脂乳:见第A.1章。
4.3 4%2。3,5-氯化三苯四氦唑(TTC)水溶液:见第A.2章。4.4青霉素G参照溶液:见第A.3章。