1范围
本标准规定了婴幼儿食品和乳品中脲酶的测定方法。本标准适用于婴幼儿食品和乳品中脲酶的定性检验。
2原理
脲酶在适当酸碱度和温度条件下﹐催化尿素转化成碳酸铵。碳酸铵在碱性条件下生成氢氧化铵,与纳氏试剂中的碘化钾汞复盐作用生威棕色的碘化双汞铵。
3试剂和材料
注,除非另有说明,本标准所用试剂均为分析纯,水为GB/T 6682规定的三级水。3.1试剂
3.1.1尿素(H:NCONH:)。
3.1.2钨酸钠(Naz wo.- 2H:O。
3.1.3酒石酸钾钠(CA H.O。 KNa- 4HO)。3.1.4硫酸(H:SO,).
3.1.5磷酸氢二钠(Naz HPO,).3.1.6磷酸二氢钾(KH,PO,).3.1.7碘化汞(HgI)。
3.1.8碘化钾(KD。
3.1.9氢氧化钠(NaOH)。
3.2试剂配制
3.2.1尿素溶液(10 g/L):称取尿素5g,溶解于500 mL水中。保存于棕色试剂瓶中,冰箱中冷藏,有效期为1个月。
3.2.2钨酸钠溶液(100 g/L);称取钨酸钠50 g,溶解于500 ml.水中。
3.2.3 酒石酸钾钠溶液(20 g/L);称取酒石酸钾钠10 g,溶解于500 ml水中。3.2.4硫酸溶液(50 mL/L):吸取硫酸25 mL,溶解于500 ml水中。
3.2.5︰磷酸氢二钠溶液;称取无水磷酸氢二钠9.47 g,溶于1 000 mL水中。3.2.6磷酸二氢钾溶液;称取磷酸二氢钾9.07 g ,溶于1 000 mL水中。
3.2.7中性缓冲溶液;取磷酸氢二钠溶液611 mL,磷酸二氢钾溶液389 mL,两种溶液混合均匀。3.2.8碘化汞-碘化钾混合溶液;称取红色碘化汞55 g,碘化钾41.25 g,溶于250 mL水中。
3.2.9纳氏试剂:称取氢氧化钠144 g溶于500 ml,水中,充分溶解并冷却后,再缓慢地移入1 000 mL