1范围
本标准规定了果蝇伴性隐性致死试验的基本技术要求.本标准适用于评价受试物的遗传毒性作用。
2术语和定义
2.1致死突变
基因组中发生的-种改变.当它表达时.引起携带者死亡。
2.2隐性突变
只在纯合子或半合子条件下被表达的基因组中的一种改变。
2.3伴性 基因
存在于性染色体(X或Y)上的基因。在此仅指位于X染色体上的基因。
3试验 目的和原理
隐性基因在伴性遗传中具有交叉遗传特征,即雄蝇的x染色体传给F代雄蝇,又通过F代雌蝇
传给F代雄蝇。位于X染色体上的隐性基因在F代雄蝇为杂合性,不能表达,而能在半合型F:代雄
蝇表现出来。据此.利用眼色性状由X染色体上的基因决定,并与X染色体的遗传相关联的特征来作
为观察在X染色体上基因突变的标记.故以野生型雄蝇(红色圆眼,正常蝇)染毒,与Base(Muller-5)雕
蝇(淡杏色棒眼.在两个X染色体上各带一个倒位以防止F代把处理过的父系X染色体和母系X染色
体互换)交配.如雄蝇经受试物处理后,在X染色体上的基因发生隐性致死.则可通过上述两点遗传规
则于F:代的雄蝇中表现出来,并籍眼色性状为标记来判断试验的结果。即根据孟德尔分类反应产生四
种不同表型的Fx代,有隐性致死时在F:代中没有红色圆眼的雄蝇。
4仪器和试剂
4.1 仪器
电热恒温干燥箱.生化培养箱、立体解剖显微镜.放大镜.空调机.麻醉瓶、果蝇培养管、试管盘及架。
白瓷板、海绵垫、毛笔、海绵塞. .
果蝇饲养用具洗净后于120 C干燥消毒2 h后备用。
4.2试剂
乙醚.75%乙醇.丙酮、吐温。