1范围
本标准规定了同步测定饲料中β-激动剂沙丁胺醇、莱克多巴胺和盐酸克仑特罗的液相色谱质谱联用法(LC-MS)法。本标准适用于配合饲料,浓缩饲料和添加剂预混合饲料中沙丁胺醇、菜克多巴胺和盐酸克仑特罗的测定。本标准中沙丁胺醇,莱克多巴胺和盐酸克仑特罗的检测限均为0.01 mg/kg,定量限均为0.05 mg/kg.
2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不透用于本标准,然面,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的*新版本。凡是不注日期的引用文件,其*新版本适用于本标准。
GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法(GB/T 6682-1992.neq 1SO 3696,1987)GB/T 14699.1 饲料―采样
3原理
试样经磷酸甲醇溶液提取,用固相萃取柱净化后,经反相Ca柱梯度洗脱分离,采用质谱检测器以三种物质的质量色谱峰保留时间和特征离子定性、确证,并用外标法定量。
4试剂和溶液
除特殊注明外,本标准所用试剂均为分析纯。水符合GB/T 6682二级用水规定。4.1乙睛:色谱纯。
4.2甲醇。
4.3磷酸甲醇提取液;向3.92g浓磷酸中加入200 mL水,再用甲醇定容到1 000 mL。4.4冰乙酸溶液(2%):10 mL冰乙酸用水稀释至500 mL。
4.5硫化钠溶液(1 g/L):称取0.250 g硫化钠(NagS·9H,O)用水溶解,并定容至250 mL.4.6SPE小柱淋洗液与洗脱液
4.6.1潜洗液:移取9 mL浓盐酸于1 000 ml水中,摇匀。
4.6.2洗脱液;移取10 mL25%的氨水于100 mL容量瓶中,用甲醇定容。4.7流动相
A液;甲酸铵3.65g溶于500 ml去离子水中,用甲酸调pH至3.80.B液:乙腈,色谱纯。
4.8沙丁胺醇、莱克多巴胺和盐酸克仑特罗标准溶液
4.8.1︰标准贮备液:称取沙丁胺醇、莱克多巴胺和盐酸克仑特罗(标准品含量均>98 %)各 50 mg分别于50 mL棕色容量瓶中,用甲醇溶解,并定容至刻度。于冰箱中4℃保存,保存期一个月。
4.8.2标准工作中间液:移取沙丁胺醇,莱克多巴败和盐酸克仑特罗标准贮备液(4.8.1)各1 mL于100 mL容量瓶中,用冰乙酸溶液(4.4)定容。