1范围
本标准**法和第二法适用于各种食品中蛋白质的测定,第三法适用于蛋白质含量在10 g/100 g以上的粮食.豆类奶粉.米粉、蛋白质粉等固体试样的测定。本标准不适用于添加无机含氮物质,有机非蛋白质含氮物质的食品的测定。
2原理
食品中的蛋白质在催化加热条件下被分解,产生的氨与硫酸结合生成硫酸铵。碱化蒸馏使氨游离,用硼酸吸收后以硫酸或盐酸标准滴定溶液滴定,根据酸的消耗量计算氮含量,再乘以换算系数,即为蛋白质的含量。
3试剂和材料
3.1试剂
除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T 6682规定的三级水。3.1.1硫酸铜(CuSO.·5HgO)。
3.1.2硫酸钾(KgSO, )。
3.1.3硫酸(H,SO,)。3.1.4硼酸(H,BO, )。
3.1.5甲基红指示剂(C Hy:N, O: )。
3.1.6浪甲酚绿指示剂(CH,Br,O. S) 。
3.1.7亚甲基蓝指示剂(C。Hg ClNRS· , HO)。3.1.8氢氧化钠(NaOH).
3.1.9 95%乙醇(CH,OH。3.2试剂配制
3.2.1―硼酸溶液(20 g/L):称取20 g硼酸﹐加水溶解后并稀释至1 000 mL。
3.2.2氢氧化钠溶液(400 g/1):称取40 g 氢氧化钠加水溶解后,放冷,并稀释至100 ml.。
3.2.3硫酸标准滴定溶液[c(一H,SO,)] 0.050 0 mol/L或盐酸标准滴定溶液[c(HC1)]0.050 o mol/L.3.2.4甲基红乙醇溶液(l g/L):称取0.l g甲基红,溶于95%乙醇,用95%乙醇稀释至100 ml。3.2.5亚甲基蓝乙醇溶液(1 g/L):称取0.1 g亚甲基蓝,溶于95%乙醇,用95%乙醇稀释至100 mL。