1 范围
本标准规定了化妆品中咖啡因的液相色谱检测方法。
本标准适用于化妆品中咖啡因的检测。
本标准的咖啡因测定低限:10 mg/kg。
2 规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的新版本。凡是不注日期的引用文件,其新版本适用于本标准。
GB/T 6379测量方法与结果的准确度(正确度与精密度)(所有部分)
3 原理
化妆品中的咖啡因用甲醇超声提取,离心,取上清液过滤,采用配有紫外检测器的液相色谱仪测定。根据其保留时间定性,标准工作曲线法定量。
4 试剂与材料
除另有说明,所用试剂均为分析纯,水为超纯水。
4.1 甲醇:优级纯或者色谱纯。
4.2 标准品:咖啡因:纯度≥99.5%。
4.3 咖啡因标准储备液(500 mg/L):准确称取0.05 g咖啡因,精确到0.0001 g,于50 mL烧杯中,用适量甲醇溶解,溶液移入100 mL容量瓶中,用甲醇定容至刻度,混匀。4.4 咖啡因标准工作液:分别准确移取咖啡因标准储备液(500 mg/L) 0.05 mL、0.5 mL、2.5 mL、5 mL、10 mL至25 mL容量瓶中,用甲醇稀释至刻度,摇匀,即得1 mg/L、10 mg/L、50 mg/L、100 mg/L、200 mg/L的系列标准工作溶液;在4℃保存,可使用一周。
5 仪器
5.1 液相色谱仪,配有紫外检测器。
5.2 超声波清洗仪。
5.3 高速离心机。
5.4 注射式样品过滤器(有机溶媒型,孔径0.45μm)
5.5 锥形瓶:具磨口塞,50 mL。
6 测定步骤
6.1 试样的处理
称取化妆品0.5g,精确到0.001g,置于50 mL锥形瓶中,准确加人甲醇8 mL,在超声波清洗仪上超声20min,将溶液转移至10 mL比色管中,用甲醇稀释至刻度,混匀。将溶液移人离心管中,在 12 000r/min下离心10 min后,取上清液经0.45μm注射式样品过滤器过滤,滤液供测定用。